調整好氮氣鋼瓶所需壓力（鋼瓶上減壓閥的輸出壓力），一般為0.1左右。打開(kāi)控制面板上的F2開(kāi)關(guān)，同時(shí)打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān)，讓其抽走過(guò)取樣室的空氣。氮氣充入操作室內，以手套向外伸直為止（不能過(guò)多充入，小心手套爆裂。），此時(shí)應立即關(guān)閉F2開(kāi)關(guān)。然后打開(kāi)F3與F4的開(kāi)關(guān)，使操作室內的氣過(guò)渡到過(guò)道室，直到手套向內伸直為止，為防止手套爆裂，此時(shí)應馬上關(guān)閉F3與F4的開(kāi)關(guān)，這樣氮氣的一次置換完成了，重復以上方法，做5到6次，做完后，整個(gè)氮氣的置換就完成了，關(guān)閉減壓閥和鋼瓶總閥。
混合氣體的置換方法：調整好混合氣體鋼瓶所需壓力（鋼瓶上減壓閥的輸出壓力），一般為0.1左右。打開(kāi)控制面板上的F3開(kāi)關(guān)，同時(shí)打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān)，讓其抽走取樣室內的空氣?；旌蠚獬淙氩僮魇覂?，以手套向外伸直為止（不能過(guò)多充入，為防止手套爆裂。），此時(shí)應立即關(guān)閉F3開(kāi)關(guān)，然后打開(kāi)F1和F2開(kāi)關(guān)，使操作室內的氣過(guò)渡到取樣室內，直到手套向內伸直為止，為防止手套爆裂此時(shí)應立即關(guān)閉F1與F2的開(kāi)關(guān)，這樣混合氣的一次置換完成了，重復以上方法，做5到6次，做完后，整個(gè)氣體的置換就完成了，這時(shí)操作室內就形成了厭氧環(huán)境，并關(guān)閉真空泵開(kāi)關(guān)。打開(kāi)F5，并調節面板上的穩流閥和流量計，使流量計的流量為10ml/min。直至全部實(shí)驗結束，關(guān)閉減壓閥和混合氣總閥。
真正達到你所需的厭氧狀態(tài)，還要用鈀粒分篩來(lái)吸收操作室內的剩余氧分子，最后用指示條（指示條的藍色上加一滴純水）來(lái)測量操作室是否還有氧，指示條變色表明已經(jīng)是厭氧環(huán)境了，此時(shí)就可以進(jìn)行厭氧菌的培養了。
實(shí)驗中，如果忘記了做實(shí)驗的工具或別的東西，需要拿到操作室里去，首先打開(kāi)取樣室的外門(mén)，把所需的東西放入取樣室內，關(guān)緊外門(mén)，打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān)，再讓其抽取樣室內的空氣。一般壓力為-0.06到-0.08左右，到了后關(guān)閉真空泵開(kāi)關(guān)，打開(kāi)F1開(kāi)關(guān)，向過(guò)道室內充入氮氣，使壓力表上的指示針回落到零位，關(guān)閉F1開(kāi)關(guān)，再打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān)，再抽真空，到壓力后，關(guān)閉真空泵開(kāi)關(guān)。打開(kāi)F4開(kāi)關(guān)，向取樣室內充混合氣直止壓力表指針回落到零位，關(guān)閉F4開(kāi)關(guān)，打開(kāi)取樣室內門(mén)，把東西挪到操作室內后，關(guān)閉內門(mén)，如果從操作室向外拿就直接打開(kāi)取樣室門(mén)（置換好氣體后沒(méi)有打開(kāi)過(guò)取樣室的外門(mén)的前提下），把東西放入取樣室后關(guān)閉內門(mén)，再打開(kāi)外門(mén)就可把東西拿出來(lái)了。取樣室不是在置換氣體狀態(tài)中壓力應為零.
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