氣體是哺乳動(dòng)物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生供給細胞生長(cháng)增殖的能量和合成細胞生長(cháng)所需用的各種成分。開(kāi)放培養時(shí)一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。CO2既是細胞代謝產(chǎn)物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養液的pH有直接關(guān)系。動(dòng)物細胞多數需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細胞培養過(guò)程中,隨著(zhù)CO2釋放量的增多,培養基會(huì )變酸,因此常在培養基中加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構成一個(gè)緩沖對)來(lái)調節pH。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個(gè)反應的進(jìn)行。培養箱中CO2濃度應與培養液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養箱中CO2濃度設定在5%,培養液中NaHCO3的加入量應為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應為3.95 g/L。 控制二氧化碳濃度,這就是為什么二氧化碳培養箱成為細胞或組織體外培養環(huán)境的重要原因。